线粒体功能障碍与血管内皮损伤的研究进展

线粒体功能障碍会导致ATP的生成减少,活性氧的产生增加,被认为是血管内皮损伤的触发因素之一。许多因素与线粒体功能障碍有关,如线粒体DNA突变、线粒体融合与分裂失衡、线粒体自噬受损等。本文综述了线粒体的质量控制过程和线粒体功能障碍在血管内皮损伤中的作用机制,以期为动脉粥样硬化的有效防治提供新的思路。     

评价一种新CYP2C9突变型对药物代谢的影响

目的 在体外表达细胞色素P2C9(32T>C),构建酶促反应体系,检测其对甲苯磺丁脲(tolbutamide)的代谢活性。方法 利用定向诱变技术,以细胞色素P2C9野生型的互补DNA为反义链,获得细胞色素P2C9*3以及细胞色素P2C9(32T>C)的complementary DNA,利用杆状病毒穿梭载体bacmid抽提试剂盒获得bacmid,转染伪黏虫卵巢细胞,充分表达后提取微粒体蛋白质,并用免疫印迹法检测其表达量。在体外条件下,测定各型细胞色素P2C9催化甲苯磺丁脲代谢的最大反应速率V_m和米氏常数K_m,评价新突变体的催化功能。 结果 利用昆虫表达系统表达获得细胞色素P2C9*1、细胞色素P2C9*3和细胞色素P2C9(32T>C)3种微粒体蛋白质。免疫印迹结果显示,新变异型蛋白表达水平接近于野生型。体外代谢实验结果显示,细胞色素P2C9(32T>C) 针对甲苯磺丁脲的体外清除率(V_m/K_m)明显低于野生型,体外酶学活性为野生型的12.40%。结论 在体外条件下,细胞色素P2C9(32T>C)对甲苯磺丁脲的代谢活性明显下降,提示携带有该基因型的患者服用细胞色素P2C9的底物药时,体内代谢速率可能会有不同程度的降低,用药前需考虑调整剂量。